北京医科大学学报 2000年第3期第32卷 药学研究

作者：梁鸿赵玉英崔艳君刘沁舡

单位：北京大学药学院天然药化研究室, 北京100083

关键词：柴胡；化学；黄酮类；分离和提纯；色原酮酸

［摘要］ 目的：研究北柴胡的化学成分。方法：用色谱法和波谱解析方法对北柴胡根的化学成分进行分离和结构鉴定。结果：共得到8个化合物：柴胡色原酮酸（1），芦丁（2），槲皮素（3），异鼠李素（4），异鼠李素3-O-葡萄糖甙（5），葛根素（6），7,4′-二羟基-异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖甙（7）,色氨酸(8)。结论：化合物1为新的天然产物，其余化合物均为首次从北柴胡中获得。

［中图分类号］ R932.41［文献标识码］ A

［文章编号］ 1000-1530（2000）03-0223-03

flavonoids from the roots of Bupleurum chinense DC.

lIANG Hong, ZHAO Yu-Ying, CUI Yan-Jun, LIU Qin-Xiang

(Division of Natural Medicinal Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences，

peking University, Beijing100083)

aBSTRACT objective: To study the chemical constituents of the roots of Bupleurum chinense DC. Methods: Chemical compounds were isolated and their structures were identified by the repeated chromatographies and spectral analyses. Results: Eight compounds were obtained as saikochromic acid (1), rutin (2), quercetin(3), isorhamnetin(4), isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside(5), puerarin(6), 7,4′-dihydroxy-isoflavone 7-O-β-D-glucoside(7) and tryptophane(8). Conclusion: Compound 1 was a new natural product, and compounds 2-7 were obtained from the plant for the first time.

KEY WORDSBupleurum chinense/chem； flavones/isol; Saikochromic acid▲

柴胡为伞形科（Umbelliferae）柴胡属（Bupleurum）植物。具疏散退热，舒肝升阳之功效，主治感冒发热，寒热往来，疟疾，胸肋胀痛，月经不调及子宫脱垂等症。现代药理研究证明柴胡具有解热、镇痛、镇静、抗炎、免疫增强、保肝利胆、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等作用。全世界有柴胡属植物200种，我国已报道有42种，17变种及7变形(潘胜利等。中国的药用柴胡及其药理作用的研究。第三届中药研讨会论文摘要集，上海，1996，27-28）。《中华人民共和国药典》 (1995年版) 规定北柴胡Bupleurum chinense DC. 和南柴胡B. scorzonerifolium Willd为药用柴胡。国内、外学者对北柴胡的药理活性研究较多，化学方面仅对北柴胡挥发油成分及北柴胡皂甙含量测定有报道。我们对北柴胡化学成分进行了较系统的研究，从北柴胡根的95%（体积分数）乙醇提取物中分离得到了皂甙、黄酮、色原酮、有机酸等成分^［1～5］，现又分离鉴定了8个化合物，分别为：柴胡色原酮酸（1），芦丁（2），槲皮素（3），异鼠李素（4），异鼠李素3-O-葡萄糖甙（5），葛根素（6），7,4′-二羟基-异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖甙（7）及色氨酸（8）。化合物1为新的天然产物，其余化合物均为首次从北柴胡中分离得到。

化合物1为淡黄色针晶，¹HNMR给出6.15（1H,d,J=1.6Hz）,6.43(1H,d,J=1.6Hz), 6.51(1H,s)3个质子信号，¹³CNMR显示9个碳信号。以上数据与从北柴胡得到的色原酮母核数据相似，所以1可能为色原酮类化合物。其IRυ_maxcm^－1呈现2 200～2 800（COOH）和1 668,1 620（C=O）为α，β-不饱和COOH特征吸收。EI-MS给出222［M］⁺，178［M-COOH+H］⁺，149［M-COOH-CO］⁺ 等明显的分子离子峰和碎片峰，所以确定化合物1为5,7-二羟基-2-羧基色原酮，该化合物为一新的天然产物，命名为柴胡色原酮酸（saikochromic acid）。

1仪器及药材

熔点用X₄型显微熔点仪测定，温度计未校正。红外光谱用Perkin-Elmer 983型仪器测定，KBr压片。紫外光谱用Shimadzu UV-260型分光光度仪测定。核磁共振用Bruker AM-500型核磁共振仪测定，TMS作为内标。质谱用Kyky-ZHP-5^#型质谱仪测定。以上测定由本校重点实验室及分析仪器测试中心进行。

北柴胡Bupleurum chinense DC购自陕西省宝鸡市医药公司第二批发站。由本院天然药物学系陈虎彪教授鉴定。

2提取和分离

北柴胡干燥根粉20.0 kg经95%(体积分数)EtOH渗滤，提取物依次用EtOAc、n-BuOH萃取。得n-BuOH部分296 g，取其中229.5 g经硅胶(200～300目)干柱色谱，CHCl₃-MeOH-H₂O(体积比为65∶35∶10)洗脱得29个组分(Fr.1-Fr.29)，Fr.29经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物1(10.0mg)，化合物2(70.0mg)；Fr.28经反复硅胶柱色谱得化合物6(40.0mg)；Fr.1经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物3(5.0mg)及化合物4(10.0mg)；Fr.10经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物8(40.0mg)。EtOAc部分以石油醚和甲醇分配得甲醇部分(385.0g)及石油醚部分，取甲醇部分281.0g经硅胶柱色谱CHCl₃-MeOH梯度洗脱得20流份，流份20经反复硅胶柱色谱得化合物5(30.0mg)及化合物7(29.0mg)。

3结构鉴定

化合物1：淡黄色针晶，IRυ^KBr_max cm^－1: 3410,2200-2800(COOH), 2915,2846(CH), 1668,1620(C=O),1610,1507(芳环)， 1415，1346，1171，801。 EI-MS m/z：222［M］⁺，194，178［M-COOH+H］⁺，149［M-COOH-CO］⁺，44。¹HNMR(DMSO-d₆)：6.15（1H,d,J=1.6Hz，6-H）,6.43(1H,d,J=1.6Hz，8-H), 6.51(1H, s， 3-H)。

¹³CNMR（DMSO-d₆）（C-2～C-10，）：164.2，108.0，183.2，162.2，98.5，163.7，93.9，157.6，104.4。为柴胡色原酮酸（saikochromic acid）。

化合物2：淡黄色粉末，mp.180～188℃，HCl-Mg粉反应及Molish反应阳性，与芦丁标准品共薄层，Rf值一致。¹HNMR(δ,DMSO-d6)：6.18(1H，d,J=2 Hz,H-6），6.37(1H,d,J=2Hz,H-8),6.83(1H,d,J=8Hz, H-5′), 7.53(1H,dd,J=8,2Hz,H-6′), 7.54(1H,d,J=2Hz, H-2′)，5.33(1H,d,J=8Hz,glc H-1), 5.17(1H,brs, rham H-1)。¹³CNMR(DMSO-d₆,δ)数据(表1)与文献［6］报道完全一致。故鉴定化合物2为芦丁。

表1黄酮类化合物的碳谱数据(δ，DMSO-d₆)

Table 1¹³CNMR data of flavonoids（δ，DMSO-d₆）

c 5 a b 7 2 156.1 156.1 152.2 153.9 3 133.0 132.7 122.6 122.2 4 177.3 176.9 178.5 174.6 5 161.0 160.8 127.1 127.0 6 98.6 98.4 115.0 115.5 7 164.0 163.7 162.6 161.3 8 93.6 93.5 102.1 103.4 aglycone 9 156.3 156.1 157.6 157.2 10 103.9 103.7 116.8 118.4 1′ 121.0 120.7 123.9 123.6 2′ 115.1 114.9 129.9 129.9 3′ 149.3 149.0 115.0 114.9 4′ 146.6 146.5 147.3 156.9 5′ 113.4 112.9 115.0 114.9 6′ 122.0 121.9 129.9 129.9 cH₃O 55.6 55.4 glc 1 100.7 100.9 100.0 2 74.2 74.0 73.1 3 77.3 76.1 77.1 4 69.8 70.8 69.6 5 76.3 75.7 76.3 6 60.6 66.6 60.6