摘要目的：探讨子宫内膜癌多药耐药(multidrug resistance 1, MDR1)基因1产物P-糖蛋白(P-gp)表达与子宫内膜癌MDR的关系。 方法：用SP免疫组化法测定40例子宫内膜癌，10例子宫内膜增殖症和10例 正常子宫内膜组织 P-gp表达,并与PR受体、细胞分级和临床分期等预后因素进行相关分析。结果：[ HTSS （1）上述 所有组织均有P-gp表达，其中子宫内膜癌P-gp强阳性表达率较正常子宫内膜组织高，差异 有 显著性；与子宫内膜增殖症比较，二者差异无显著性。（2）P-gp强阳性表达与子宫内膜 癌临床分期、组织病理类型、PR受体以及5年生存率无关; 与细胞分级有关，低分化内膜癌P -gp强阳性较中、高分化内膜癌P-gp强阳性表达高，二者差异有统计学意义。结 论：子宫内膜 癌患者对抗肿瘤药具有先天性抗药性，P-gp表达是子宫内膜癌化疗疗效不佳的原因之一。

中国图书资料分类法分类号R737.33

S tudy on the detection of multidrug resistance 1 gene product

P-gp in endometrial carcinomas and its clinical significance

GUI Li-Ming， WEI Li-Hui， FU Qi， ZHOU Rong，TU Zheng， YU You-Zhi， et al

(Department of Gynecology, People's Hospital, Beijing Medical University, Bei jing100044)

ABSTRACTObjective: To study the clinical significance of P-gp expression in endometrial carcinoma.Methods: The expres sion of P-gp on paraffin section in 40 cases of endometrial carcinoma, 10 of endometrial neo plasia and 1 0 of normal endometrium were detected by SP immunohistochemical methods. Results : The expression of P-gp was found in all tissues mentioned above. The strongly positive staining in the endometrial carcinoma was significantly higher than t hat of the normal endometrium and associated with carcinoma cell grades, not ass oc iated with clinical prognostic factors.Conclusion: That th ere are primary multidrug resistance for endometrial carcinoma which may be on e of the reasons for chemotherapy failure.

MeSHDurg toleranceEndometrial neoplasmsP-glycoprotein^☆Gene expression

多药耐药（multidrug resistance, MDR）指肿瘤细胞对一种抗 肿瘤药产生耐药性后， 对结构与作用机制不同的抗肿瘤药产生交叉耐药的现象。这种现象可以是先天的，也可以是 化疗诱导产生的。目前认为其共同的生物学基础是MDR1基因产物P-gp过量表达，或与肿瘤 细胞 内药物结合或直接从细胞膜上排除抗肿瘤药物，从而降低药物对肿瘤细胞的毒性所致^{［ 1，2］}。通 过对人、鼠实体瘤、细胞系的一系列研究，已证明仅P-gp就足以将细胞内抗肿瘤药物泵出而 致耐药性；耐药程度及细胞内抗肿瘤药物浓度均与P-gp表达水平密切相关^［3，4］ 。进一步 研究还发现，MDR基因表达水平与激素受体有关，激素可逆转肿瘤细胞的多药耐药性 ^［5，6］。

子宫内膜癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，晚期预后差，同其他恶性肿瘤一样，化疗也 是子宫内膜癌临床治疗的重要手段之一。目前有关子宫内膜癌MDR的研究报道不多，我们用S P免疫组化法对子宫内膜癌、子宫内膜增殖症和正常子宫内膜组织MDR1基因产物P-gp表达水 平的研究，以助于了解子宫内膜癌耐药性的起因、检测，进而指导临床治疗，提高子宫内膜 癌患者的治疗率和生存率。

1材料与方法

1.1病例和标本

随机选取1990～1997年间本院住院手术的子宫内膜癌患者40例，平均年龄59.7岁，其中腺癌30例、腺鳞癌5例、棘腺癌和透明细胞癌各2例，浆乳癌1例， 子宫内膜增殖症和正常子宫内膜组织各10例；平均年龄分别为54.3岁和56.1岁；术前均无放 疗、化疗史；术后病理诊断按FIGO（1988）标准分期^［7］；随访6～72个月。

1.2染色方法

取上述患者术中标本，用100 g^.L^－1中性福尔马林固定，石蜡包埋。石蜡 切片厚5μm ，HE染色，确定诊断。抗P-gp单克隆抗体JSB-I及SP试剂盒均为丹麦DAKO公司产品。石 蜡 切片经脱蜡和微波加热处理后，依次进行免疫组化染色：1∶10(体积比)正常马血清封闭，1 ∶50(体积比)抗P-gp 单克隆抗体(兔抗马)JSB-I及1∶400(体积比)生物素标记的马抗鼠IgG和1∶400(体积比)链 酶抗生物素蛋白-过氧化物酶 复合物，最后用DAB显色，苏木素复染，酒精脱水，二甲苯透明，封片。每一步骤间都用T ris-HCl缓冲液冲洗。每批均设阴性对照，实验条件严格一致。

1.3结果判断

参照Consantine等^［5］的标准。用半定量的方法，高倍镜(×200)下判定结果， 细 胞浆或细胞膜上有黄色或棕黄色颗粒的肿瘤细胞数超过10％为P-gp表达阳性，否则为阴性 ，其 中阳性细胞数达10%～25％,1＋;26%～50％,2＋；51%～75％,3＋；76%～100％，4＋； 染色强度 ：黄色，1＋；棕黄色，2＋；黄褐色，3＋。大于或等于5＋为强阳性表达；小于或等于4＋ ，为弱阳性表达。

1.4统计学处理

χ²检验，Log-Rank检验和确切概率计算。

2结果

2.1P-gp在子宫内膜癌、子宫内膜增殖症及正常内膜组织中的表达

全部子宫内膜癌、子宫内膜增殖症和正常子宫内膜组织都有P-gp 表达,P-gp 强阳性 表 达率分别为77．5%（31／40）,60．0%（6／10）和10．0%（1／10）。3组患者中 ，子宫内膜癌组织与子宫内膜增殖症之间P- gp强阳性表达差异无显著性(P＞0.05)；与正常子宫内膜组织(仅1例分泌期子宫内膜P-g p呈强阳性表达)比较，二者P-gp强阳性表达率差异有显著性(P＜0.001)。

2.2子宫内膜癌P-gp表达与预后因素的关系

子宫内膜癌P-gp表达强弱与病理分期、组织病理分型及PR受体表达无关，与子宫内膜 癌 病理分级有关，G₁期和G₂期与G₃期P-gp强阳性表达分别为32.1%和75%，二者差异有 统计学意义(P＜0.05)，见表1。

2.3子宫内膜癌P-gp强阳性表达与预后的关系

随访所有子宫内膜癌患者，共10例死亡，其中P-gp强阳性者死亡7例(7/26)；P-gp弱阳 性者死亡3例(3/14)，5年生存率分别为50.91%和58.34%,P＞0.05，二者差异无统 计学意义。

3讨论

70年代Biedler等^［3］首先在体外发现MDR现象,之后许多学者研 究表明，MDR现象与MDR 1基因调控的P-gp过量表达有关，是恶性肿瘤化疗取得成功的主要障碍之一。据相关资料统 计 发现,90%以上的恶性肿瘤患者死亡或多或少都与耐药有关。我们用SP免疫组化方法探讨正 常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜癌患者P-gp表达情况，发现上述所有组织都表达P -g p。与同为激素相关肿瘤的卵巢组织和乳腺组织相比,子宫内膜组织P-gp表达更具有普遍性, 证 实子宫内膜癌不需要化疗诱导即先天对化疗耐药^［8，9］,这一结论与临床 观察子宫内膜癌通 常对化疗不敏感相吻合。此结果与Schneider等^［8］和Kuo等 ^［10］用同 样方法检测的结果一致,较Constanine等^［5］报道的子宫内膜癌P-gp 高62%;与 Thiebaut等报道的子宫无P-gp表达相反。此外,还发现子宫内膜癌P-gp强阳性表达较正常 子宫内膜高,二者差异有显著性(P＜0.001),说明P-gp表达可能与子宫内膜癌的生物 学行为有关。

从表1可看出，子宫内膜癌P-gp表达强度与病理分期、组织类型以及孕激素受体 有无关 系不确切，但与子宫内膜癌分化程度有关，分化越差,肿瘤细胞P-gp表达越高，低分化子宫 内膜癌细胞P-gp强表达(75%)较中高分化子宫内膜癌(32.1%)高，二组差异有统计学意义( P＜0 .05)，与Kodama等^［11］多数作者研究的结果一致。至于子宫内膜 癌P-gp表达强度能否像 肾癌一样作为临床预后因素，还有待探讨。Chan等^［12］研究认为,P-gp表达阳性 只能作为非先天性耐 药肿瘤(如儿童的软组织肉瘤)的预后指标,而对先天性耐药肿瘤，P-gp表达只 能说明这类 肿瘤普遍耐药,子宫内膜癌属于后一类肿瘤。关于孕激素受体浓度与P-gp表达关系研究不多 。有作者报道孕激素通过受体可调节P-gp的表达，逆转P-gp引起的耐药性^［13］ 。我们分别测 定了16例PR(+)和13例PR(－)患者的P-gp强阳表达率(分别为68.7%和38.6%)，χ²检验无 统计学意义,这可能与病例数过少有关，明确的结论有待进一步的了解。

表1子宫内膜癌P-gp表达与临床预后因素 的关系

Table 1The relationship between P-gp ex pression in

endometrial carcinoma and clinical prog nostic factor

P-gp strong

positive P value