中图分类号R342.24；R373.2；R977

文献标识码A文章编号1000-1492(2000)04-0324-02

应用多聚酶链反应(PCR)对产妇血清中HCV RNA检测，以及用酶免疫方法对其乳汁和血清中抗HCV抗体的检测，以探讨乳汁和血清中HCV RNA和抗HCV-IgG、IgA、IgM的关系。

1材料与方法

1.1检测对象均来自本院1996年～1999年产前检查产妇1 612例，其中有189例曾有输血史或献血浆史的产妇。住本院31例血清HCV RNA阳性产妇，年龄24～32岁，以及64例血清HCV RNA阴性产妇，年龄23～32岁。

1.2检测标本血清均为产妇分娩前清晨静脉血。乳汁标本处理：先用温水清洗一下，再用消毒巾消毒乳头，然后挤出3～6 ml乳汁放入无菌试管，4℃过夜后吸取中间乳清层，离心取上清液-20℃冻存待检。

1.3方法

1.3.1HCV RNA采用多聚酶联(PCR)反应的方法进行检测。HCV RNA提取采用Chomczynski的异硫氰酸胍一步法^〔1〕。套式PCR引物：在HCV RNA的5末端非编码区内选择内外引物，用AB199 Ⅰ型DNA合成仪合成并转化。逆转录反应：在样品RNA中加入逆转录反应混合液，42℃反应45 min,95℃ 5 min为逆转录产物cDNA。第1次PCR引物为外引物，模板为逆转录产物cDNA，第2次PCR引物为内引物，模板为第2次PCR产物，按常规进行PCR反应。

1.3.2抗HCV抗体抗HCV-IgG，ELISA间接法，试剂由上海科华公司提供；抗HCV-IgM，试剂由全军医学检验中心提供；HCV-IgA，EIA法，上海科华公司产品(HRP抗人IgA是DaKo公司产品)。

1.4统计学处理显著性差异采用χ²检验。

2结果

2.131例HCV RNA阳性产妇的乳汁中抗HCV抗体IgG阳性为5例(16.1%)，IgA阳性为17例(54.8%)，IgM阳性为2例(6.45%)，并且乳汁抗体(至少一种抗体)阳性为22例(71.0%)，乳汁中HCV RNA阳性为1例(3.23%)，而血清中抗HCV抗体，IgG阳性为29例(93.5%)，IgA阳性数为13例(41.9%)，IgM阳性数为2例(6.45%)。并且血清中抗体(至少一种抗体)阳性数为30例(96.8%)(表1)。

表195例产妇乳汁和血清中抗HCV抗体阳性数(%)

HCV RNA n 乳汁 血清 IgG IgA IgM IgG IgA IgM + 31 5(16.1%) 17

(54.8%) 2

(6.45%) 29

(93.5%) 13

(41.9%) 2

(6.45%) - 64 0 1

(1.56%) 0 2

(3.13%) 1

(1.56%) 0

2.264例HCV RNA阴性产妇的乳汁中，只有抗HCV-IgA阳性1例(1.56%)，IgG、IgM和HCV RNA阳性均为0，而血清中抗HCV-IgG阳性为2例(3.13%)，IgA阳性为1例(1.56%)，IgM均没有检出阳性。

2.331例HCV RNA阳性产妇中，有23例曾有输血史和2例曾有献血浆史。

3讨论

HCV RNA阳性产妇的乳汁中含抗HCV抗体数(71.0%)明显多于HCV RNA阴性产妇乳汁(1.56%)，其主要存在是以抗HCV-IgA为主的抗体^〔2〕，并且三种抗体各自阳性率都明显高于HCV RNA阴性产妇(P＜0.05)，反而HCV RNA阳性产妇乳汁中含抗HCV抗体数(71.0%)低于其血清中存在抗HCV抗体数(96.8%)。

由于HCAg刺激乳腺浆细胞，生成分泌型抗HCV IgA抗体，因而乳汁此三种抗体是以HCV-IgG为主的抗体。31例HCV RNA阳性产妇主要是慢性稳定型肝患者，因而无论是血清中还是乳汁中抗HCV IgG阳性率都高于抗HCV IgM阳性率。

作者简介：胡敏，男，33岁，主治医师

参考文献

1，冯明和.血清抗-HCV与HCV RNA检测临床意义的探讨.肝脏病杂志，1995；3(3)：154

2，苏建明.丙型肝炎产妇初乳中HVB-IgA的检测.临床检验杂志，1995；13(5)：252

2000-02-22收稿，2000-07-20修回