摘要目的观察银杏叶提取物(EGB)对环磷酰胺模型小鼠记忆和免疫的影响。方法以环磷酰胺(Cy 80mg·kg^-1 sc)诱导C₅₇BL/6J小鼠免疫功能低下和学习记忆障碍模型，采用跳台法作行为检测，单向免疫扩散法和二硝基氟苯诱导迟发型超敏反应法测定有关免疫指标。结果EGB(40、80 mg·kg^-1.d^-1×20 d,ig)可减少小鼠的跳台错误次数，延长SDL，缩短EL；使小鼠降低的IgG、耳片肿胀度、脾及胸腺指数明显增加。结论EGB对Cy诱导的学习记忆障碍能明显改善，对Cy诱导的免疫功能低下有明显的增强作用。

中国图书资料分类法分类号R282.71

Effect of extracts of ginkgo biloba leaves on memory and

immunity in mice with cyclophosphamide

Ming Liang,Zhang Yan,Li Weiping et al

(Dept of Pharmacology,Anhui Medical University,Hefei230032)

AbstractObjectiveTo study the effect of extracts of ginkgo biloba leaves (EGB) on memory and immunity in mice with cyclophosphamide(Cy).Methods The immunosuppressed and dysmnesic mice were induced by Cy(80 mg·kg^-1，sc).The ability of learning and memory were explored using step-down test.The immunomodulatory effects of the drug were measured by simple diffusion method and delayed type hypersensitivity(DTH).ResultsEGB (40,80mg·kg^-1，ig,qd×20 days) reduced the mistaken time of step-down,prolonged SDL,shortened EL,increased the level of serum IgG and ear swelling.ConclusionEGB improves the impairment of learning and memory induced by Cy.EGB has an enhanced effect on experimental immunosuppression in mice.

MeSHginkgo biloba; plant extracts/pharmacol;cyclophosphamide;learning/drug eff;memory/drug eff;immunity mice

银杏是我国的特产植物，其开发利用意义深远。银杏叶提取物(extracts of ginkgo biloba leaves,EGB)的研究是一个热点^〔1，2〕。最近文献^〔3〕报道，采用环磷酰胺诱导C₅₇BL/6J小鼠免疫功能低下的同时，亦可造成记忆缺失，故我们观察了EGB对上述模型小鼠的影响。

1材料

1.1药品和试剂银杏叶提取物(EGB)由安徽金寨神栗食品有限公司提供(总黄酮甙33.84%，总萜内酯11.18%)；美国洋参丸，金日投资(集团)有限公司产品；环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)， 上海第十二制药厂生产； 单抗鼠IgG， 上海第一医科大学生物试剂公司产品；二硝基氟苯(DNFB)和丙酮分别为上海金山县兴塔化工厂和江苏马垫溶剂厂生产。

1.2动物C₅₇BL/6J小鼠，体重(20±3) g,♀♂各半，由本校动物中心(皖医实动准字第01号)提供。

1.3仪器小鼠跳台装置用浙江宁海白石药检仪器厂生产的声—光—电单向穿梭箱改装而成。

2方法和结果

实验分组情况如表中所示。小鼠灌胃给药，qd×20d，测试前5d，小鼠一次性sc Cy 80 mg·kg^-1，以造成免疫功能低下和学习记忆障碍的动物模型。各组数据以±s表示，组间比较采用t检验。

2.1EGB对Cy诱导小鼠学习和记忆障碍的影响最后一次给药后1 h，采用跳台法^〔3〕对小鼠进行训练，24h后进行测验。观察并记录小鼠跳下平台的潜伏期(step-down latency,SDL)、跳上平台的潜伏期(escape latency,EL)以及跳台错误次数。

与Cy组比较，EGB可使小鼠跳台错误次数减少，SDL延长及EL缩短。见表1。

2.2EGB对小鼠血清IgG的影响测定IgG含量前5 d，各组小鼠(蒸馏水组除外)每只ip 10%羊红细胞(SRBC)0.2 ml致敏。5d后，小鼠摘眼球取血，采用单向免疫扩散法^〔4〕测定血清IgG含量。

与Cy组比较，EGB 40、80mg·kg^-1可使小鼠降低的血清IgG含量明显升高。见表2。

表1EGB对Cy诱导小鼠学习和记忆障碍的影响(±s,n=10)

组别 剂量

(mg·kg^-1)

跳台错误次数

测验时潜伏期(s) 训练(5 min) 测验(3 min) SDL EL 蒸馏水 — 4.4±2.8 2.1±0.7 93.6±62.3 2.6±1.1 Cy 80 7.6±1.7^** 3.4±1.2^** 42.7±28.5^* 4.3±1.4^** 洋参丸+Cy 200+80 4.9±2.3^△△ 2.3±1.0^△ 81.4±64.8 2.7±1.6^△ EGB+Cy 20+80 6.8±1.6 2.7±1.3 56.6±43.7 3.5±1.2 40+80 5.1±3.2^△ 2.8±0.9 69.3±38.9 2.9±2.0 80+80 4.6±2.5^△△ 2.4±0.9^△ 85.7±55.4^△ 2.9±1.7^△

与蒸馏水组比较：*P＜0.05，**P＜0.01；与Cy组比较：^△P＜0.05，^△△P＜0.01

表2EGB对小鼠血清IgG的影响(±s,n=10)

组别 剂量(mg·kg^-1) IgG含量(g·L^-1) 蒸馏水 —

13.8±3.2 Cy 80 9.2±2.8^** 洋参丸+Cy 200+80 13.6±3.6^△△ EGB+Cy 20+80 11.5±3.8 40+80 13.0±3.5^△ 80+80 13.4±4.4^△

与蒸馏水组比较：**P＜0.01；

与Cy组比较：^△P＜0.05，^△△P＜0.012.3EGB对DNFB诱导小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响参照文献^〔5〕，攻击前5天，小鼠腹部去毛，将1% DNFB丙酮麻油溶液100 μl涂抹于上以致敏，致敏5天后，在小鼠右耳两面涂1% DNFB丙酮麻油溶液进行攻击，24 h后处死小鼠，取下直径8mm的左右耳片称重。同时取小鼠胸腺和脾脏称重，计算耳片肿胀度(左右耳片重量之差)以及脾、胸腺指数(每10 g体重的脏器毫克数)。

与Cy组比较，EGB 40、80mg·kg^-1可使小鼠降低的耳片肿胀度、脾及胸腺指数明显增加，见表3。

表3EGB对DNFB诱导迟发型超敏反应的影响(±s,n=10)

组别 剂量(mg·kg^-1) 耳肿胀度(mg) 胸腺指数 脾指数 蒸馏水 —

13.3±2.9

15.6±4.3

39.2±9.7 Cy 90 7.6±4.0^** 7.2±3.7^** 21.6±7.8^** 洋参丸+Cy 200+80 12.8±2.6^△△ 10.7±3.4^△ 27.8±11.3 EGB+Cy 20+80 10.5±3.9 8.5±6.5 21.4±6.5 40+80 12.7±5.2^△ 9.3±5.1 24.9±9.9 80+80 13.0±3.4^△△ 11.6±4.6^△ 28.7±7.1^△

与蒸馏水组比较：**P＜0.01；与Cy组比较：^△P＜0.05，^△△P＜0.01

3讨论

本研究表明，环磷酰胺在引起C₅₇BL/6J小鼠免疫功能低下的同时，可使小鼠学习记忆缺失，这与文献^〔3〕报道一致。此方法简单易行，同时可观察学习记忆及免疫功能两方面指标，有一<