摘要：目的探讨S-100蛋白和HMB₄₅单克隆抗体在恶性黑素瘤诊断中的价值。方法以痣细胞痣、乳腺癌、卵巢癌作为对照病例，对58例恶性黑素瘤进行SP免疫组化染色。结果58例恶性黑素瘤中HMB₄₅阳性56例（96.6％），对照组有3例阳性；S-100蛋白染色有55例阳性（94.8％），对照组中，痣细胞痣100％阳性，乳腺癌、卵巢癌中偶见阳性病例。结论S-100蛋白和HMB₄₅单克隆抗体对恶性黑素瘤的诊断敏感性均较高，但S-100蛋白的特异性较HMB₄₅差，两者联合应用有助于恶性黑素瘤的诊断。

中国图书资料分类法分类号：R739.5；R392.31

Immunohistochemistry about cutaneous malignant melanomas

Zhao Zhenglong, Meng Gang, Tang Hongshan et al

(Department of Dermatology, The Second Department of Medicine,

Anhui Medical University, Hefei230001)

AbstractObjectiveTo investigate the effects of S-100 protein and HMB₄₅ monoclonal antibodies in the diagnosis of malignant melanomas.MethodsWith a group case-control study on nevocellular nevi, breast cancers, ovary cancers, 58 cases of malignant melanomas were stained with SP method of immunohistochemistry.ResultsAmong 58 cases of malignant melanomas, 56 cases are HMB₄₅ positive (96.6%). There were only 3 positive cases in the controls. 55 cases were S-100 protein positive (94.8%). In the controls, all nevocellular nevi were positive (100%). In the cases of breast cancers and ovary cancers, there was few positive.ConclusionS-100 protein and HMB₄₅ are higher sensitive in the diagnosis of malignant melanomas, but the specificity of S-100 protein is lower than that of HMB₄₅. The combination of S-100 protein and HMB₄₅ helps to the diagnosis of malignant melanomas.

MeSHmelanoma; immunohistochemistry

恶性黑素瘤是一种好发于皮肤的高度恶性肿瘤，目前在病理诊断和鉴别诊断中还存在一些困难，特别是转移性恶性黑素瘤和无色素性恶性黑素瘤。近年来S-100蛋白和HMB₄₅单克隆抗体被广泛地应用于恶性黑素瘤的诊断中，但在实际诊断中却遇到阴性结果与光镜、电镜的恶性黑素瘤诊断相矛盾^〔1〕。为此，我们应用S-100蛋白和HMB₄₅两种抗体，以痣细胞痣、乳腺癌、卵巢癌为对照病例，检测一组恶性黑素瘤，比较它们对恶性黑素瘤的特异性和敏感性，进一步评价S-100蛋白和HMB₄₅在恶性黑素瘤诊断中的价值。

1资料和方法

选取安徽医科大学第一附属医院病理科1985年至1998年存档标本，明确诊断的恶性黑素瘤58例（原发于皮肤44例，淋巴结转移性14例，其中色素性46例，无色素性12例）。痣细胞痣33例（皮内痣12例，交界痣10例，混合痣11例），乳腺癌12例，卵巢癌10例。S-100蛋白和HMB₄₅单克隆抗体试剂盒均购自福州迈新试剂公司。免疫组化技术采用SP法。阳性结果为瘤细胞浆内或核浆内呈棕黄色颗粒，根据染色深浅为弱阳性（+），中度阳性（）和强阳性（）。

2结果

S-100蛋白染色阳性反应颗粒出现在细胞浆和细胞核内，倾向弥漫整个细胞内。58例恶性黑素瘤中阳性55例（94.8％），其中原发于皮肤44例中阳性42例（95.5％），转移性14例中阳性13例（92.9％），色素性恶性黑素瘤46例中阳性45例（97.8％），无色素性恶性黑素瘤12例中阳性10例（83.3％）。33例痣细胞痣均呈阳性反应。12例乳腺癌和10例卵巢癌中各有1例呈阳性反应，其阳性率分别为8.3％和10％。详见表1。

表1S-100蛋白免疫组化染色结果

类型 例数 反应强度 阳性例数（％） - ＋ 原发性恶性黑素瘤 44

2 8

19

15

42（95.5） 转移性恶性黑素瘤 14 1 4 7 2 13（92.9） 皮内痣 12 0 7 3 2 12（100.0） 交界痣 10 0 4 5 1 10（100.0） 混合痣 11 0 6 4 1 11（100.0） 乳腺癌 12 11 1 0 0 1（8.3） 卵巢癌 10 9 1 0 0 1（10.0）

HMB₄₅染色阳性反应颗粒仅出现在细胞浆内，58例恶性黑素瘤中阳性56例（96.6％），其中原发于皮肤44例中阳性43例（97.7％），转移性14例中阳性13例（92.9％），色素性46例中阳性45例（97.8％），无色素性12例中阳性11例（91.7％）。33例痣细胞痣中仅交界痣和混合痣中各有1例呈阳性反应，12例乳腺癌中有1例呈阳性反应（S-100蛋白染色阴性病例），阳性率为8.3％，10例卵巢癌中均呈阴性。详见表2。

表2HMB₄₅免疫组化染色结果

类型 例数 反应强度 阳性例数（％） - ＋ 原发性恶性黑素瘤 44

1 2

16

25

43（97.7） 转移性恶性黑素瘤 14 1 1 4 8 13（92.9） 皮内痣 12 12 0 0 0 0（0） 交界痣 10 9 1 0 0 1（10.0） 混合痣 11 10 1 0 0 1（9.1） 乳腺癌 12 11 1 0 0 1（8.3） 卵巢癌 10 10 0 0 0 0（0）

3讨论

S-100蛋白的出现，使恶性黑素瘤的病理诊断有了可靠的手段^〔2，3〕，不同实验室可以得出不同的阳性结果，并非100％阳性^〔1，4〕。本组58例恶性黑素瘤中有55例呈阳性反应，占94.8％，痣细胞痣100％阳性，在乳腺癌和卵巢癌中各有1例呈阳性反应，这表明S-100蛋白对痣细胞来源的黑素痣、黑素瘤敏感性高，而特异性较低。因此，在病理诊断中受到一定的限制。HMB₄₅是一种抗恶性黑素瘤的单克隆抗体，能识别前黑素小体球蛋白，可与不成熟的黑素细胞及黑素瘤细胞起反应，在恶性黑素瘤的诊断中具有较高的敏感性和特异性^〔5〕。也有作者提出HMB₄₅在恶性黑素瘤的表达有很强的限制性，即对表皮的恶性黑素瘤细胞呈强阳性，对真皮、软组织及淋巴结内恶性黑素瘤细胞具有较高的弱阳性或阴性率^〔1〕。本组58例恶性黑素瘤中HMB₄₅染色阳性率为96.6％，其中原发性、转移性、色素性和无色素性恶性黑素瘤中均见有HMB₄₅反应阴性病例。这一方面可能因为少部分恶性黑素瘤不表达HMB₄₅，另一方面可能为部分转移性恶性黑素瘤HMB₄₅仅为灶性阳性反应^〔6〕。因此，为了提高阳性率，在取材时应选择瘤细胞较丰富的组织，尽量多块、多处取材观察。目前关于交界痣与恶性黑素瘤的关系难以评价，一般认为生长活跃的非典型交界痣属恶性黑素瘤的癌前期状态。本组有交界痣和混合痣2例与HMB₄₅呈弱阳性反应，而皮内痣均呈阴性反应，这提示HMB₄₅与黑素细胞分化可能有关，这些病例值得进一步密切随访观察。

在非黑素细胞来源的对照组中，S-100蛋白染色在乳腺癌和卵巢癌中各有1例呈阳性反应；而HMB₄₅染色在乳腺癌组有1例呈弱阳性反应（非S-100蛋白染色阳性病例）。在已有浅表淋巴结转移（如腋窝淋巴结、腹股沟淋巴结转移）的恶性肿瘤中<