摘要目的研究金丝桃苷(Hyp)对小鼠乙醇性胃粘膜损伤的保护作用及其与氧自由基(OFR)、一氧化氮(NO)和前列腺素(PG)的关系。方法制备小鼠乙醇性胃粘膜损伤模型，测定胃粘膜损伤面积；测定血浆、胃组织内MDA、NO和PGE₂含量。结果Hyp(20、40、80 mg·kg^-1,ip)可剂量依赖性地抑制无水乙醇诱发的小鼠胃粘膜损伤，其损伤抑制率分别为38.9%、49.6%和55.6%。Hyp可使小鼠胃粘膜损伤过程中血浆、胃组织中升高的MDA含量降低，使降低的NO水平回升。Hyp对血浆、胃组织中PGE₂含量无明显影响。结论Hyp对小鼠乙醇性胃粘膜损伤具有保护作用，其作用机制与Hyp抗氧化作用和促进NO水平恢复正常有关。

中国图书资料分类法分类号R322.44； R282.71

The protective effect of hyperin on gastric mucosal

injury in mice and its mechanism

Zhao Weizhong, Chen Zhiwu, Song Biwei et al

(Dept of Pharmacology, Anhui Medical University, Hefei230032)

AbstractObjectiveTo study the protective effect of hyperin (Hyp) on gastric mucosal injury in mice induced by absolute ethanol (Eth) and relationship of the effect with OFR, NO and PG.MethodsMake the model of gastric mucosal injury in mice induced by Eth (ig); the area of gastric mucosal injury in mice was determined; the contents of MDA, NO and PGE₂ of plasma and gastric tissue were measured.ResultsThe area of gastric mucosal injury in mice was inhibited after administration of Hyp (20, 40, 80 mg*kg^-1, ip), the inhibitory rates were 38.9%， 49.6% and 55.6% respectively, The increase of MDA formation induced by Eth was significantly decreased by Hyp (20, 40, 80 mg*kg^-1,ip), the decrease of NO content of plasma and gastric mucosal tissue was elevated to normal level, but Hyp did not obviously influence the PGE₂ contents of plasma and gastric tissue in mice.ConclusionHyp could possess protective effect on gastric mucosal injury in mice induced by Eth. Its mechanism may be related to antioxidative effect and improvement of NO level to normal.

MeSHhypericaceae/pharmacol; gastric mucosal/pathol; oxygen; free radicals; nitric oxide; prostaglandins; mice

金丝桃苷(Hyperin,Hyp)属黄酮醇苷化合物，为槲皮素-3-半乳糖。药理学研究证实，Hyp对大鼠急性胃粘膜损伤具有保护作用，并认为其细胞保护作用机制与钙拮抗有关^〔1〕。本研究进一步探讨Hyp的胃粘膜保护作用与氧自由基(OFR)、一氧化氮(NO)及前列腺素(PG)的关系。

1材料

1.1药品与试剂Hyp：由安徽医学科学研究所植化室提供，实验前用蒸馏水配制，加热溶解：N-1-萘乙二胺盐酸盐：上海化学试剂站分装厂；无水对氨基苯磺酸：上海试剂三厂；硫代巴比妥酸：上海试剂二厂；其他均为AR级试剂。

1.2动物昆明种小鼠，24 g±2 g，♀♂兼用，由安徽医科大学实验动物中心(皖医实动准字第01号)提供。

2方法

2.1小鼠乙醇性胃粘膜损伤模型制备^〔2〕取小鼠随机分为正常对照组、模型对照组和3个剂量(20、40、80 mg·kg^-1)Hyp组。Hyp采用一次腹腔注射给药(ip)，两个对照组均给予等容积的生理盐水(NS)。小鼠于给药前禁食24 h。一次给药后30 min，除正常对照组外每只均灌胃(ig)给予无水乙醇0.5 ml，在此期间肝素全身抗凝，1 h后摘眼球取血，剖腹取胃。2.2小鼠胃粘膜损伤面积测定将鼠胃固定于体积分数为10%的甲醛溶液中，20 min后剪开冲洗，置于双自体视显微镜下观察，借助测微尺计数损伤面积(mm²)^〔2〕。

2.3小鼠血浆、胃组织MDA含量测定小鼠血离心分离血浆。动物处死后迅速取胃、剪开，用4℃ NS冲洗，滤纸吸干称重制备匀浆。分别取血浆、胃组织匀浆0.3 ml，按硫代巴比妥法^〔3〕测定样品中MDA含量。

2.4小鼠血浆、胃组织NO含量测定分别取上述分离及制备后的小鼠血浆和胃组织匀浆各0.5 ml，按Green法^〔4〕测定NO含量。

2.5小鼠血浆、胃组织PGE₂含量测定分别取小鼠血浆、胃组织匀浆0.1 ml，加入0.5 mol·L^-1 KOH-甲醇溶液2 ml，温浴20 min，样品中PGE₂经脱水异构化生成T_(1)/(2)较长的PGB₁，于278 nm处测定其吸光度，计算PGE₂含量^〔5〕。

3结果

3.1Hyp对小鼠乙醇性胃粘膜损伤的影响(表1)小鼠禁食24 h后ig无水乙醇可致胃粘膜明显损伤。用药组经给予Hyp(20、40、80 mg·kg^-1,ip)后小鼠粘膜损伤面积降低，其损伤抑制率分别为38.9%、49.6%和55.6%。

表1Hyp对小鼠乙醇性胃粘膜损伤的影响(±s，n=8)

组别 剂量

(mg·kg^-1) 胃粘膜损伤面积

(mm²) 损伤抑制率

(%) 正常对照组 - 0 - 模型对照组 -

5.42±1.96^△△ - Hyp 20 3.31±1.07^* 38.9 40 2.73±1.14^** 49.6 80 2.39±0.78^** 55.6

与模型对照组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；

与正常对照组比较：^△△P＜0.013.2Hyp对小鼠血浆、胃组织MDA含量的影响表2显示，模型对照组小鼠血浆和胃组织中MDA含量均较正常对照组增高，而经ip Hyp 20、40、80 mg·kg^-1后，用药组小鼠血浆、胃组织MDA含量均较模型组明显降低。3个剂量Hyp对胃组织MDA含量的抑制率分别为32.6%、39.4%和41.0%。

表2Hyp对小鼠血浆、胃组织中MDA含量的影响(±s,n=5)

组别 剂量

(mg·kg^-1) 血浆MDA

(μmol·L^-1) 胃组织MDA

(μmol·g^-1) 正常对照组 -

19.40±4.30

150.5±29.49 模型对照组 - 26.93±4.14^△ 242.9±31.34^△△ Hyp 20 21.26±3.09^* 163.7±43.08^** 40 19.08±2.52^** 147.3±33.24^** 80 18.65±2.43^** 142.9±32.16^**

与模型对照组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；

与正常对照组比较：^△P＜0.05，^△△P＜0.013.3Hyp对小鼠血浆、胃组织NO含量的影响(表3)模型对照组小鼠在无水乙醇ig 1 h后，血浆、胃组织中NO含量降低，用药组小鼠在ip Hyp后再给予无水乙醇未见NO含量明显降低。与模型组比较3个剂量的Hyp分别使胃组织NO含量升高13.8%、47.6%和53.2%。

表3Hyp对小鼠血浆、胃组织中NO含量的影响(±s,n=5)

组别 剂量

(mg·kg^-1) 血浆NO

(μmol·L^-1) 胃组织NO

(μmol·g^-1) 正常对照组 -

6.95±0.77

21.82±1.54 模型对照组 - 4.90±0.72^△△ 13.90