摘要目的研究大剂量酮洛芬（Ket）、吲哚美辛（Ind）致小鼠胃粘膜损伤及其与胃组织中前列腺素（PG）、氧自由基（OFR）及一氧化氮（NO）含量的关系。方法①测定小鼠胃粘膜损伤指数；②测定胃组织PGE₂、MDA含量；③测定血浆、胃组织中NO含量。结果16，32 mg·kg^-1 Ket和Ind均能引起小鼠胃粘膜损伤，Ind的致损伤作用更为显著。Ket和Ind组胃组织中PGE₂、MDA含量较对照组降低，而NO含量显著增高。结论大剂量Ket、Ind可致胃粘膜损伤，且Ket引起的损伤程度较轻；胃组织内PGE₂含量降低和NO含量异常增高可能是Ket和Ind致胃粘膜损伤的重要机制。

中国图书资料分类法分类号R971.1

Mechanism of gastric mucosal injury induced by ketoprofen

and indomethacin at high doses

Zhao Weizhong, Cen Deyi, Wang Yu et al

(Dept of Pharmcology, Anhui Medical University, Hefei230032)

AbstractObjectiveTo study the roles of prostaglandin (PG), oxygen free radicals (OFR) and nitric oxide (NO) on gastric mucosal injury induced by ketoprofen (Ket) and indomethacin (Ind) at high doses in mice.Methods① The index of gastric mucosal lesion in mice was determined; ② The contents of PGE₂ and MDA in gastric tissue were determined; ③ The contents of NO in plasma and gastric mucosa were measured.Results The index of gastric mucosal lesion in mice after administration of Ket and Ind (16,32 mg·kg^-1,ig) respectively was significantly increased. And the lesion of induced by Ind was more serious. Ket and Ind could decrease the contents of PGE₂ and MDA in gastric tissue, and 16,32 mg·kg^-1 Ind or 32 mg·kg^-1 Ket could significantly increase the contents of NO in gastric tissue in mice.ConclusionKet and Ind at high doses could induce the gastric mucosal injury. This effect may be related to the decrease of PGE₂ and the abnormal increase of NO of gastric tissue.

MeSHketoprofen/adv eff;indomethacin/adv eff;gastric mucosa/drug eff ; prostaglandins/anal;oxygen; free radicals/anal;nitric oxide/anal;mice

一般公认内源性前列腺素（PG）对胃粘膜具有保护作用，非甾体抗炎药（NSAIDs）引起的胃肠不良反应与抑制PG合成酶（环氧酶）使胃粘膜合成PG减少有关。酮洛芬（Ketoprofen,Ket）系芳香基丙酸类NSAID，具有与阿司匹林相似的抗炎、镇痛和解热作用，且因其对胃肠刺激较轻，易为患者所耐受^〔1〕。而吲哚类NSAID吲哚美辛（Indomethacin,Ind,消炎痛）则因胃肠不良反应发生率高（治疗剂量时为35%～50%），严重可致出血、溃疡，甚至穿孔，而使其应用大受限制。不同类型的NSAIDs对胃粘膜影响差异如此之大，其胃粘膜损伤机制除抑制PG合成外是否还有其他因素参与尚不清楚。本研究在比较大剂量Ket和Ind对小鼠胃粘膜影响的同时，研究了两药对胃组织前列腺素E₂(PGE₂)、脂质过氧化物(MDA)和一氧化氮(NO)含量的影响，以求较深入地了解NSAIDs胃肠反应的毒理学机制。

1材料

1.1动物昆明种小鼠，24 g±2 g,♀♂兼用，安徽医科大学实验动物中心（皖医实动准字01号）提供。

1.2药品与试剂Ket:安徽省化工研究院药物研究所提供;Ind:由安徽医科大学临床药理研究所赠送；实验时二药用50 g·L^-1吐温-80增溶（混悬液pH均为6.0）。硫代巴比妥酸（TBA）：上海生化试剂二厂；N-1-萘乙胺盐酸盐：上海化学试剂站分装厂；无水对氨基苯磺酸：上海试剂三厂；其他均为AR级试剂。

1.3仪器内切式组织匀浆机：浙西机械厂；751G-可见紫外分光光度计：上海分析仪器厂。

2方法

2.1分组与给药按体重将小鼠随机分为溶媒对照组、Ket和Ind等剂量组。实验期间小鼠均给予平衡饲料。Ket组：16，32 mg·kg^-1,qd×5d（ig）；Ind组：经预试16，32 mg·kg^-1毒性较大，故采取qd×2d（ig）；溶媒对照组：等容量溶媒，qd×5d（ig）。末次给药后1 h摘眼球取血，剖腹取胃。

2.2小鼠胃粘膜损伤指数测定动物处死后取胃，向胃内注入2 ml 3.3 mol·L^-1甲醛，并置于同浓度甲醛中充分固定，20 min后沿胃大弯剪开胃，展开置于双目显微镜下观察出血性病灶，用测微尺计算胃粘膜损伤面积，作为该小鼠的胃粘膜损伤指数（LI）^〔2〕。

2.3小鼠胃组织PGE₂含量测定小鼠处死后迅速取胃剪开，用4℃生理盐水（NS）清洗，滤纸吸干称重，NS定容后制备胃匀浆。取匀浆0.1 ml在50℃碱性环境中温育20 min,组织中PGE₂经脱水后异构化生成PGB₁，于278 nm处测定其吸光度，计算PGE₂含量^〔3〕。

2.4小鼠胃组织中MDA含量测定取小鼠胃组织匀浆0.3 ml，按硫代巴比妥法^〔4〕测定胃组织中MDA含量。

2.5小鼠血浆、胃组织中NO含量测定取小鼠抗凝血离心，分离血浆。分别取血浆、胃组织匀浆各0.5 ml，按Green法^〔5〕测定NO含量。

3结果

3.1大剂量Ket、Ind对小鼠胃粘膜LI的影响表1显示，16，32 mg·kg^-1 Ket与Ind均明显升高小鼠胃粘膜损伤指数，而Ind组小鼠胃粘膜损伤较Ket组更为显著（P＜0.01）；Ind不仅致小鼠胃粘膜表面出血，还可造成胃粘膜细胞严重脱落，胃重量较对照组明显减轻（P＜0.01）；小鼠在ig Ind后饮食、活动明显减少，甚至有动物出现死亡（16 mg·kg^-1组死亡1只，32 mg·kg^-1组死亡2只），经剖腹观察均有明显胃穿孔，故动物死亡亦为胃损伤所致。Ket两个剂量组虽对小鼠胃粘膜有一定损伤，但动物状态良好，饮食、活动均基本正常，未见有动物死亡和胃穿孔发生。

表1大剂量Ket、Ind引起小鼠胃粘膜损伤的比较（±s）

组别 剂量

(mg·kg^-1) n 给药

天数 胃粘膜损伤指数

(mm²) 胃组织重量

（g) 溶媒对照组 — 8 5 0 0.243±

0.020 Ket组 16 8 5 1.57±

0.80^**△△ 0.238±

0.022 32 8 5 2.57±

0.64^**△△ 0.218±

0.019^* Ind组 16 7 2 3.49±

0.83^** 0.196±

0.023^** 32 6 2 4.30±

0.94^** 0.189±

0.024^**

与对照组比较：^*P＜0.05；^**P＜0.01

Ket 与Ind相应剂量组比较：^△△P＜0.013.2Ket、Ind对小鼠胃组织中PGE₂和MDA含量的影响与正常对照组比较，Ket与Ind组可见小鼠胃组织中PGE₂含量降低，虽Ind组降低更为明显，但经统计学处理，两药对应剂量组之间PGE₂含量差异无显著性。

Ket、Ind尚可使小鼠胃组织中MDA含量降低，且可见MDA含量变化与PG含量的降低呈一定的平行关系。见表2。

表2Ket、Ind对小鼠胃组织中PGE₂和MDA含量的影响（n=5，±s）

组别 剂量（mg·kg^-1） PGE₂（nmol·g^-1） MDA(nmol·g^-1) 溶媒对照组 — 398.0±54.2 314.3±62.5 Ket组 16 330.5±35.9^* 258.6±28.7 32 293.7±27.7^** 251.1±33.6^*