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一、材料和方法
确诊的CA标本60例，活检标本按常规提取组织DNA，0.8%琼脂糖凝胶电泳，M750uVis-A型微量紫外可见光测量A260、A230、A280吸光度，以鉴定组织DNA的纯度，并符合要求，计算组织DNA含量。组织DNA含量(μg)=测定DNA A260×50μg×稀释倍数×总溶积(ml)。
准确吸取组织DNA 1 μg，相应HPV质粒DNA1 μg并作系列稀释为阳性对照，鲑精DNA为阴性对照，点样于经预处理的硝基纤维素膜。高严格条件下分别与地高辛标记的HPV 6b、11、16、18DNA探针杂交，出现蓝紫色斑点为阳性。用Tecbias-6803图像分析系统测定杂交信号的积分吸光度，作为DNA的相对含量。
二、结果和讨论
60例中43例斑点杂交阳性，阳性率为71.67%。HPV 6b、11、16、18阳性率分别为61.7%、30.0%、11.7%、0%。单一型别HPV感染28例，二型以上混合感染15例。提示本组病例以低危型别HPV感染为主。
研究表明，HPV 6b DNA杂交信号积分吸光度各组间差异有非常显著意义。男性组6 743±2 895，排卵前期组8 310±7 746；排卵后期组11 494±7 591，妊娠组58 447±21 717。F′=10.77，P＜0.01。妊娠组显著高于其余各组，差异有非常显著意义(P＜0.001)。与Darron报道一致。本研究成功的关键在于准确控制组织DNA点样量，使各样本组织DNA在等量的前提下进行，用图像分析技术测量杂交信号积分吸光度，通过比较吸光度，间接了解目的基因的相对含量。为保证实验的可靠性，必须同时设立阳性对照，并使其点样量呈浓度梯度变化。分析发现，阳性对照标本的杂交信号积分吸光度与其DNA含量相一致，呈直线相关。
(收稿：1998-06-01修回：1998-09-02)
