咽炎饮是我院耳鼻喉科多年临床应用的验方,是以薄荷、板蓝根、川芎、石斛、山楂、五味子、胆草、栀子、玄参、桔梗、甘草、红花、麦冬13味中药组合而成，经水煎制成的汤剂。主要用于治疗急慢性咽炎,尤其是治疗慢性及顽固性咽炎，取得了很好的临床疗效。由于咽炎饮汤剂有味极苦，剂量偏大缺点，现把汤剂改为颗粒剂。为保证原方剂的药效及临床疗效，选用正交实验设计法，优选出由汤剂改为颗粒剂的最佳制备工艺。目的为今后深入研究开发该药提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料 (1)药材：薄荷、板蓝根、川芎等13味药材饮片购置张家口市药材公司饮片厂，均符合《中国药典》2005版第一部要求。(2)菌株：金黄色葡萄球菌；由张家口市药品检验所提供。(3)培养基：本院微生物实验室按照《中国药典》2005版二部附录XI培养基Ⅱ的要求制作。

1.2 正交实验设计 因素—水平的确定：本方剂是用传统水煎法，根据处方中各味药所含有效成分的物理性质，提取方法仍用传统水提法。为了减少赋形剂用量，用乙醇除去非有效成分。经过预实验选择影响有效成分提取的四个主要因素：提取溶媒用量(A)、提取次数(B)、提取时间(C)、醇浓度(D)作为考察内容，每个因素选3个水平。以L9(34) 正交实验设计系统进行实验。列因素—水平表见表1。

表1 咽炎饮颗粒剂因素—水平（略）

1.3 评价指标的选择 咽炎饮颗粒剂具有清热消炎的功效，板蓝根是方中主药，具有很强抗细菌、抗病毒作用［1］。选择体外抑菌法，观察提取液对临床常见的致病菌金黄色葡萄球菌的抑菌效果作为第一评价指标。本方中薄荷具有清热解毒散风，消除咽喉肿痛作用，桔梗辛散苦泄，开宣肺气而利咽喉，麦冬能养阴润燥、滋润咽喉、益胃生津；诸药合用具有以上功效。因此，把总提取物经干燥后称其重量的多少作为第二评价指标。观察总有效成分提取的程度及产品的出品率的情况，用抑菌圈直径与固体提取率的乘积为综合评价指标。

1.4 实验方法

1.4.1 样品的制备：按处方药量称取9份，按正交实验表2规定的实验要求加规定量的水煎煮提取规定次数和时间。分别合并提取2次及提取3次的提取液，浓缩至1 g/ml，按表2规定的乙醇含量加入乙醇，静置48 h以上，滤过，回收乙醇，加水至100 ml，加盖密封，115℃，灭菌40 min,放置15 d，在无菌条件下滤过，得到1～9号实验样品，备后面实验用。

1.4.2 体外抑菌实验：材料：按正交实验方案的1～9号实验样品。实验菌：金黄色葡萄球菌。培养基：普通培养基。方法：将金黄色葡萄球菌用生理盐水稀释至1.1×108/ml，取该菌液1 ml置平皿中加普通培养基，按管碟法进行实验操作［2］，测量各抑菌圈直径。

1.4.3 总提取物的测定：精密量取样品溶液10 ml，置干燥至恒重的蒸发皿中，于水浴蒸干，在105℃干燥2 h，移至干燥器中冷却1 h，称定其重量，根据公式：干燥固体物提取率=W×D/S×100%，计算得出结果（W提取物干燥后称定的重量g，D为稀释倍数，S为单剂处方的取药量g）。将实验测定的结果，利用SPSS 11.0软件处理，进行方差分析。9批样品液抑菌圈直径测定结果及正交实验数据见表2，方法分析见表3。

表2 正交实验数据及统计分析（略）

2 正交实验结果与分析

表2极差及表3概率可以看出,4种因数的影响程度依次为D＞B＞A＞C。其中B因素有显著性意义，D因素有非常显著性意义，A因素的影响无显著性意义。从加水量K值看,加10倍量水与加12倍量水的差别不大,为节约用水考虑,每次加水量确定为加10倍量水。C因素煎煮时间的影响无显著性意义。从K值看,以每次煎煮时间40 min为优选时间。最佳制备工艺为D2、B2、A2、C1，即按处方量取生药加10倍量水,煎煮2次，每次40 min,滤过,合并滤液,滤液浓缩至1∶1,加乙醇含量达60%,静置48 h,滤过,回收乙醇,浓缩至浸膏备用。

表3 方差分析（略）

3 讨论

3.1 咽炎饮颗粒剂处方药味较多,有效成分复杂,制备工艺直接影响该剂型疗效。本方剂抗菌消炎作用为本方的主治功能。选择体外抑菌实验能控制制剂质量,选用两个指标来评价制备工艺,即固体提取率与体外抑菌实验相乘积为综合评价指标,更有利于全面、综合考察。从实验结果看,咽炎饮颗粒最佳制备工艺为D2、B2、A2、C1,而在生产中由于红花,薄荷等具有挥发性应当后下,以保留其有效成分。

3.2 实验中测定抑菌圈直径的大小,与供试品浓度、细菌浓度、培养基厚度等因素有关，因此在实验操作时必须做到：供试品浓度应准确，在滴加溶液时用同样的定量加样器，且9个实验供试品的体积必须相同；菌液的加入量以不超过培养基体积的2%为宜；培养基必须均匀铺平，为了使平皿中培养基的厚度一致不倾斜，要求操作台应稳固、台面用水平仪校准。双碟厚薄均匀，大小一致，双碟中的培养基要定量加入，不要随意倾入，培养基内无气泡。这样，可以使测定的结果更准确，更有实际意义。

3.3 咽炎饮颗粒剂其配方合理,其中栀子、红花、川芎等均有抗炎作用与主药板蓝根起到很好的协同作用。颗粒剂的特点是保持汤剂特色，克服临用时煎煮、易霉变的缺点，必要时对颗粒进行包衣，根据包衣材料的性质可使颗粒具有防潮性、缓释性或肠溶性等。将来咽炎饮颗粒剂也可做成含片，使用起来既方便，又能产生持久的局部消炎、杀菌、收敛止痛作用。

【参考文献】
1 马清钧，王淑玲.常用中药现代研究与临床.第1版.天津：科技出版社，1995.132134.

2 郑钧镛，王光宝.药品微生物学及检验技术.第1版.北京：人民卫生出版社,1989.364376.