K562/MDR细胞与树突细胞融合诱导P170蛋白特异的细胞毒性T
2022-07-29
来源：求医网
（宁波）为了通过细胞融合方法将P170抗原负载树突细胞(DC)，探讨能否有效诱导P170蛋白特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答。研究者 通过贴壁黏附获得外周血单核细胞，用GM-CSF+IL-4诱导培养DC，并以TNF-α促进DC成熟，于第7天收获DC，然后分3组：①DC与耐药细胞系K562/MDR细胞融合以负载P170抗原；②DC与K562/MDR细胞共培养；③单独DC培养。通过流式细胞术(FCM)检测PE-P170/FITC-HLA-ABC抗体双标细胞来评估融合率。将3组细胞分别与T细胞共同孵育5 d，通过MTT法比较各组T细胞对P170+靶细胞K562/MDR及HL-60/VCR的杀伤活性。结果 采用PEG-DMSO诱导的DC与K562/MDR细胞的融合效率为(22.39±2.55)%，融合细胞同时表达DC表型和P170分子，HLA-ABC和P170双阳性表达率为(26.90±3.63)%，明显高于共培养组的(4.52±1.77)%，融合细胞能激活T淋巴细胞，显示出对P170+靶细胞产生抗原特异细胞毒作用，效靶比为25∶1时，对K562/MDR细胞的杀伤率为(65.75±4.65)%，明显高于共培养组[(22.15±2.40)%]。可见 K562/MDR与DC融合能够诱导P170蛋白特异的CTL应答，可用于多药耐药白血病的免疫治疗。
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