人尿酸转运蛋白在肾小管上皮细胞的定位表达研究
2022-07-29
来源：求医网
（北京）为了明确人尿酸转运蛋白(hUAT)在人肾小管上皮细胞(HKC)内的定位表达情况。研究者利用DNA重组技术构建hUAT。绿色荧光蛋白的融合基因分别导入人HKC及非洲爪蟾卵细胞。构建hUAT的谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体并制备抗hUAT的多克隆抗体。利用免疫荧光、Western印迹及激光共聚焦显微镜等技术观察hUAT在人HKC的定位表达。结果成功制备了兔抗hUAT-GST多克隆抗体。利用该抗体及构建的pEGFP-hUAT荧光表达载体进行Western印迹和免疫荧光检测，结果表明hUAT是一种膜蛋白，并且表达于人HKC胞膜上，Northern blot结果也表明人HKC在高尿酸环境中的hUAT表达水平明显上调。可见hUAT并非典型的膜转运蛋白，可能是以二聚体的形式才能够表达在细胞膜上，它在细胞内的定位表达可能需要特殊的转录调控机制。
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