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转化生长因子-β刺激人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因

2022-07-29
来源:求医网
(上海)为了探讨TGF-β对人CTGF表达的影响,研究者应用RT-PCR和蛋白印迹技术,观察TGF-β1对人HK-2α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGF mRNA及其蛋白质表达的影响,同时观察肾小管上皮细胞形态改变。结果HK-2细胞有基础量的CTGF mRNA和蛋白质分子表达,在TGF-β1刺激下,其表达量显著增加,经不同浓度TGF-β1干预24 h后,CTGF mRNA表达量明显升高,且呈剂量依赖性。1 ng/ml TGF-β1刺激时,CTGF mRNA表达量开始显著增加, 5ng/ml时达到高峰,10 ng/ml时略有下降, CTGF mRNA表达量分别为对照组的2.40倍,3.34倍和2.73倍。 CTGF mRNA表达量呈时间依赖效应。TGF-β1干预30 min后,CTGF mRNA表达量为对照组的1.48倍,2 h后为对照组的2.14倍;CTGF mRNA表达量在24 h达到高峰,持续至36 h,分别为对照组的3.19倍和2.75倍;0.5 ng/ml TGF-β1刺激时,CTGF蛋白表达量略有增加,5 ng/ml时达到高峰,10 ng/ml时略有下降。在TGF-β1干预下,HK-2细胞由立方形铺路石样逐渐转变为长梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量α-SMA表达。大部分细胞转分化的时间明显晚于CTGF mRNA和蛋白质表达开始增加和达到高峰的时间。可见未转分化的肾小管上皮细胞可以表达CTGF;TGF-β1 可诱导体外培养的肾小管上皮细胞CTGF高表达。