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北京创MN血型基因型测定法
张永琇
北京友谊医院肾移植研究中心李志祥等，用等位基因特异反向PCR扩增法进行MN血型基因型测定，首次将本来属于测定未知DNA序列的反向PCR技术应用于已知DNA序列的血型基因型测定之中，从而建立了应用反向PCR技术测定血型基因型的新方法。据悉，日本的科研人员已将该方法用于其它血型系统基因型的测定。
MN血型系统是人类红细胞的多态抗原之一，M抗原和N抗原的血型糖蛋白A（GPA）存在于红细胞膜上，GPA是由GPA基因所编码，GPA基因存在于第四染色体的长臂上，M抗原和N抗原的不同，原因在于该基因的第2外显子序列中三个碱基不同，从而导致这两个抗原一级结构的改变。由于血型糖蛋白A、B、E（GPA、GPB、GPE）基因的结构上有95%以上具有同源性，因此，李志祥等先后采用多种扩增和区分等位基因技术，并采用T4DNA连接酶将其环状化，并以其作为模板，用反向PCR扩增法对其进行测定，成功地测出MN血型系统的基因型亚型一MGMG、MGMT、MGN、MTN、NN。
该研究避免了GPA、GPB、GPE基因同源性的扩增交叉干扰，并采用等位基因特异性引物MN-MF（18mer）、MN—NF（20mer）、MN-GR（20mer）、MN—TR（20mer）来扩增等位基因的靶DNA片段。这一研究成果在骨髓移植植活判定、刑侦领域的个体别等方面均有较高的社会效益与经济效益。最近，该成果获得北京市科技进步奖三奖。
2000.08.29
中国医药报
