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骨骼DNA检验技术

2022-07-30
来源:求医网

骨骼DNA检验技术

据北京科技报:DNA检验是现代法庭科学技术中一朵闪亮的奇葩,为人类识别不同个体提供了可靠的技术选择。即使是蛛丝马迹,现代警方也能利用DNA技术找出真正的罪犯,令案犯伏首。但是,当案件中只有白骨留存时,DNA技术就显得较苍白,世界各国法医学家都希望在骨骼检验中也能利用DNA技术,得到准确结论。可喜的是,这个世界性的难题最近已被我国公安的科研人员顺利攻克。

传统的DNA检验方法是将人体细胞通过蛋白酶消化后破裂细胞膜,释放出细胞中的DNA,然后通过沉淀的方法将DNA沉淀出来,最后溶解后进行DNA扩增和其他操作,通过检测仪器将所扩增的DNA片段显现出来,最后根据遗传学原理分析检测结果得到检验结论。

当使用同样的方法对骨骼中的骨细胞操作时,由于骨松质细胞和其他组织细胞不同,在坚硬的骨骼网架结构中存在,就如同植物细胞具有致密的细胞壁一样。传统的提取与消化方法不能奈何这种保护下的骨骼细胞,必须使用新的方法才能使骨骼细胞中的DNA从结构中游离出来,但游离的同时,恐怕DNA脆弱的双链不能经受剧烈震荡和强烈的化学作用,所以这就要求必须采用一种相对温和的提取方法。

经过大量实验筛选和总结,国家公安部物证鉴定中心课题组选择了CTAB作为提取骨骼DNA缓冲液的主要成分。CTAB是一种高分子化合物,中文全称为“十六烷基三甲基溴化胺”,它具有很强的消化能力,能够破坏植物的细胞壁和细胞膜。采用CTAB作为裂解骨骼组织的缓冲液,可以充分将骨组织细胞膜破坏,释放出DNA。

技术人员拿到从现场发现的骨骼,首先用手术刀片刮除骨骼表面的异物,在紫外光下照射1小时,去除骨骼表面可能存在的细菌,随后用电动锯片打开骨骼表面,露出骨骼里的骨松质层,钻取适当的骨松质,经过CTAB提取缓冲液进行裂解后,使用等体积的氯仿进行萃取,将得到的DNA成分进行纯化。

经过纯化后的DNA提取液需要再次磁珠纯化处理,磁珠在特定液体环境下与DNA吸附,在磁场的作用下被固定在离心管一边,只有DNA与磁珠结合在一起的部分被保留下来,然后使用特定洗脱液清洗,最后使用双蒸水将DNA溶解下来,这时磁珠与DNA脱离,DNA留存在液体中,这就得到了纯化好的、高质量的骨骼DNA样本。

新的骨骼DNA提取技术充分考虑了骨骼DNA本身的特点,可靠性高,在许多案件侦破中得到了应用,解决了案件中发现的尸骨的身源认定问题。2003年,该课题获得了公安部科技进步一等奖,相关的学术论文已被国际法医权威学术刊物《国际法庭科学杂志》录用,这也说明我国在此技术上已取得了领先地位。

2005.01.24