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卵巢巧克力囊肿的诊断当前仍以腹腔镜检查为金标准，即在腹腔镜直视下找到卵巢囊肿并行穿刺。如抽出的内容物为不凝的陈旧性血液，即可明确诊断。
在没有腹腔镜的基层卫生单位，可做B超检查，最好采用阴道B超，可在附件区卵巢上探及一种无回声或低回声的液性暗区，其中分散有条索状或点状的增强，则提示卵巢巧克力囊肿的可能性较大。遇此影像，可在B超监测下行囊肿穿刺，如抽出不凝的陈旧性血液亦可明确诊断。
