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医生配好精确的剂量后，用一根美容用针将其注射到相关的肌肉内。在注射过程中，要注意控制好注射的部位、剂量和手法。比如额头纹是横向纹，一般在前额部注射10～12个点;眉间纹是纵行纹，是由额肌、降眉肌和眼轮匝肌内侧缘肌肉引起，在治疗时一般注射4～5个点;鱼尾纹是由眼轮匝肌的外侧缘肌肉引起。一般在眼眶外侧各注射3个点，共6个点。颈阔肌纹一般在颏下、颈前注射5～6个点即可。
整形美容专家表示：肉毒素除皱是一种快速非侵入性的治疗方式。治疗时不需任何麻醉，但有的医生会冰敷治疗部位片刻，再选择最佳的注射部位，然后用很细的针将肉毒素注射到引起眉间皱纹的肌肉中。整个治疗过程约需10分钟，引起的疼痛是非常轻微的，许多接受过治疗的人形容像被蚊虫叮咬一样。注射后可立即回复正常活动。
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