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肛门镜检查时镜体要涂以润滑剂，用左手拇食二指将臀部分开，暴露肛管，用肛门镜头部轻柔按摩肛缘，使肛门括约肌放松后再进镜。进镜方向是先向脐孔，通过肛管后改向能尾，方能顺利到达直肠壶腹。然后取出镜检，边退镜边观察肛管直肠情况。为了观察不同角度的病变，有时需反复进人数次。观察时需注意有无息肉、溃疡、肿瘤、异物、出血点、充血、水肿、内痔、肛乳头肥大、肛隐窝炎及瘦管内口、直肠粘膜松弛等。
肛门镜检查前应先进行视诊和指诊，如发现有肛裂、直肠狭窄和脓肿者，应避免进行肛门镜检查。如必须进行肛门镜检查者，应在麻醉下进行。
