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内源性一氧化碳在小儿哮喘发病机制中的作用

2022-07-28
来源:求医网

自90年代以来,有关一氧化碳(CO)的生物学研究取得了重要进展。目前研究提示,与一氧化氮(NO)分子结构类似的CO不仅作为一种信使分子发挥重要作用,而且是又一种神经递质[1]。它具有调节平滑肌舒张,调节血流、血压,细胞内环磷酸鸟苷(cGMP)水平、细胞因子水平、NO水平、体内激素分泌,细胞及组织损伤和肿瘤免疫等复杂功能[1-4]。所有迹象表明CO和NO一样,具有重要的生理和病理学意义。目前已成为心血管、免疫和神经科学等医学领域的一个研究热点。推测CO在支气管哮喘发病机制中可能具有重要意义。为此,我们检测了正常儿童、支气管哮喘患儿血浆CO、NO和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,并在动物模型上进行验证,以探讨CO等在小儿哮喘发病机制中的作用及意义,为哮喘发病机制的研究提供新的研究途径。

对象与方法

一、临床研究

1.正常对照组:正常健康体检儿童22名,年龄2~10岁,男13名,女9名。既往均无哮喘病史,且采血前4周内无感染及用药史。

2.哮喘组:确诊为支气管哮喘的本院住院及门诊患儿26例,均为急性发作期患儿,男16例,女10例,年龄1~13岁。采血前4周内未口服及静脉滴注糖皮质激素及免疫增强或抑制剂等药物。其中16例患儿经糖皮质激素及支气管扩张剂等治疗,待临床症状缓解后,于出院前再次采周围静脉血待测。

二、动物实验研究

体重为200~250 g的健康豚鼠20只,雌雄各半,随机分为3组,每组5只。

1.哮喘组:用10%卵白蛋白腹腔注射1.0 ml将动物致敏,2周后用1%卵白蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作,出现喘息,呼吸困难和青紫等。隔日诱喘1次,共10次,末次后于15分钟内采心脏血标本并处死动物,摘取其肺脏行支气管肺泡灌洗,即由气管内缓慢注入0.9%生理盐水2 ml,保留30秒后抽出,重复4次。每例收集支气管肺泡灌洗液(BALF)6~7 ml,置4℃离心后,取上清液待测。

2.肾上腺皮质激素预防(激素)组:诱喘及操作方法同哮喘组,在每次诱喘前腹腔注射氢化可的松0.5 mg/100 g。

3.正常对照组:用生理盐水代替诱喘剂。

三、方法

1.CO水平测定:采用Chalmers血红蛋白结合及联二亚硫酸盐还原法[5]

2.NO水平测定:采用经典的镉还原柱层析和比色法,通过检测浓度以代表NO水平[6]

3.TNF-α水平测定:采用L929细胞株生物活性法测定[7]

四、统计学处理

实验数据以±s表示。组间比较用t检验,并做直线相关分析。

结果

一、哮喘患儿血浆CO、和TNF-α水平

哮喘患儿急性发作期血浆CO、和TNF-α水平均显著升高,与对照组比较差异有非常显著性(t分别=8.421, 3.088, 15.432, P均<0.01),缓解期CO和水平恢复正常(P<